Zawartość
- Bakteryjne płytki agarowe
- Wypełnienie płyt agarowych
- Przechowywanie płytek agarowych
- Odwracające płytki agarowe podczas przechowywania
- Odwracające płytki agarowe podczas inokulacji i inkubacji
Płytki agarowe są wykorzystywane przez naukowców z biologii komórkowej i molekularnej do przeprowadzania eksperymentów badawczych. Są to plastikowe płytki Petriego wypełnione agarem zmieszanym ze składnikami odżywczymi, które umożliwiają wzrost różnych mikroorganizmów, takich jak bakterie E. coli. Są one uważane za powszechny materiał konsumpcyjny w laboratoriach, ponieważ są one używane szybko i zwykle są wykonywane wewnętrznie, w dużych partiach, a następnie przechowywane.
Bakteryjne płytki agarowe
Płytki te są generalnie wytwarzane przez techników naukowych włączających agar klasy laboratoryjnej do bakteryjnej pożywki hodowlanej, takiej jak Luria-Bertani, SOC, Terrific lub eozyna błękitu metylenowego. Przygotowanie agarowej pożywki hodowlanej uzupełniają inne czynniki, które mogą być wymagane do przetrwania bakterii lub specyficzny antybiotyk (np. Ampicylina lub kanamycyna), aby zapobiec wzrostowi niepożądanych bakterii.
Wypełnienie płyt agarowych
Płytki agarowe przygotowuje się po prostu przez zmieszanie kombinacji składników odżywczych i agaru ze zrównoważonym roztworem soli fizjologicznej o pH i podgrzewając je aż do stopienia. Po nieznacznym ochłodzeniu dodaje się dodatki wrażliwe na ciepło. Ta mieszanina jest wlewana, gdy jest jeszcze ciepła (a zatem upłynniona) na dnie każdej szalki Petriego; pozostawia się do wyschnięcia i zestalenia na powierzchni, na której można umieścić zawiesiny bakteryjne. Po całkowitym ochłodzeniu płytki są oznakowane i przechowywane do momentu użycia. Właściwe przechowywanie płytek agarowych jest ważne, aby zapewnić, że właściwe bakterie są hodowane i nie występuje żadne niepożądane zanieczyszczenie, które może zakłócać wyniki eksperymentalne.
Przechowywanie płytek agarowych
Istnieje kilka sposobów przechowywania płytek agarowych, w zależności od tego, które suplementy zawierają. Jeśli dostępne są lekkie suplementy, płytki są przechowywane w ciemności, owinięte w folię lub przechowywane w pojemniku odpornym na światło. Płytki są zawsze przechowywane w lodówce lub lodówce laboratoryjnej w 4 stopniach Celsjusza lub 39,2 stopni Fahrenheita. Przechowywanie w chłodni może zapobiec lub zminimalizować wzrost niepożądanych zanieczyszczeń biologicznych.
Odwracające płytki agarowe podczas przechowywania
Niewykorzystane płyty są zawsze odwracane lub odwracane do góry nogami podczas przechowywania. Ma to na celu zapobieżenie parowaniu, jeśli płytka jest przechowywana przez długie okresy, co może wpłynąć na wydajność wzrostu bakterii lub umożliwić rozmnażanie niepożądanych organizmów, takich jak pleśnie.
Odwracające płytki agarowe podczas inokulacji i inkubacji
Po napełnieniu blaszek wilgotną zawiesiną bakterii, należy pozwolić, aby odparowała nieco przed inkubacją przez noc. Jednakże umiarkowana ilość wilgoci będzie nadal obecna. Jeśli płytka nie ulegnie odwróceniu podczas inkubacji, bakterie nie będą w stanie prawidłowo przyczepić się do agaru, co uniemożliwi im wzrost i uformuje kolonie w odpowiedni sposób lub zachęci do wzrostu niepożądanych mikroorganizmów. Każdy z tych wyników unieważni eksperyment. Ponadto, każda kondensacja lub wilgoć może powodować punktowanie, co bardzo utrudnia wybór i analizę oddzielnych kolonii. Gdy bakterie utworzą kolonie, płytka jest również przechowywana do góry nogami, aby utrzymać poziom wilgoci.