Jak uprawiać grzyby z zarodników

Zawartość

Instrukcje
Przygotowanie materiałów
Umieszczanie zarodników na płytkach
Izolowanie czystej kultury
Przygotowanie potomstwa
Inokulacja podłoża do wzrostu grzybów
Jak
Uwaga
Czego potrzebujesz

Grzyby można hodować z zarodników lub hodowli tkankowej. Kultury zarodników dają populacje genetycznie różnych grzybów. Jest przydatny przy izolowaniu i testowaniu nowych szczepów. Procedury rozwoju grzybów są specyficzne dla gatunku. Zakłada się, że producent wie, jak uprawiać grzyby będące przedmiotem zainteresowania, w szczególności po uzyskaniu wystarczającej ilości potomstwa.

Instrukcje

Kolekcja grzybów Agaricus (Zdjęcia Iana Granta, Jasona Hollingera)

Przygotowanie materiałów

Przygotuj od 500 do 1000 ml MEA zgodnie z instrukcjami producenta.
Umieścić roztwór chlorku sodu w probówkach i MEA w kolbach Erlenmeyera. Nie napełniaj probówek i fiolek więcej niż do połowy i lekko przykryj.
Sterylizować roztwór chlorku sodu, płytek MEA i Petriego (jeśli nie sterylny) w szybkowarze w temperaturze 121 stopni Celsjusza i 1 atm przez 15 do 20 minut.
Wyjąć MEA, roztwór chlorku sodu i szalki Petriego z szybkowaru i pozostawić do ostygnięcia.
Gdy MEA ostygnie wystarczająco, aby można było się nią posługiwać, ale przed zestaleniem, ostrożnie zdejmij pokrywkę z każdej szalki Petriego i wlej 10 do 20 ml stopionego MEA.
Pozostaw płytki MEA i chlorek sodu do ostygnięcia do temperatury pokojowej.

Umieszczanie zarodników na płytkach

Sterylizuj haczyk w lampie alkoholowej. Poczekaj, aż drut się rozgrzeje, aż zmieni kolor na czerwony, a następnie pozwól mu ostygnąć przez 5 sekund.
Zanurz hak w roztworze chlorku sodu, aby zebrać kroplę płynu. Rozłóż kroplę na małym obszarze z wrażeniem zarodników (lub innego źródła zarodników), aby utworzyć mieszaninę płyn / zarodnik. Powtórz ten proces kilka razy, sterylizując hak pomiędzy każdym.
Zanurz haczyk w zawiesinie chlorku sodu i zarodników, aby zebrać zarodniki.
Podnieś pokrywę płytki agarowej na tyle, aby umożliwić dostęp do haczyka.
Rozprowadź zawiesinę zarodników z haka na powierzchni agaru i ponownie weź płytkę. Powtórz tyle kart, ile chcesz (co najmniej pięć lub sześć).
Zamknij płytki agarowe folią, aby zapobiec wysuszeniu. Inkubuj zarodniki w odpowiedniej temperaturze i warunkach oświetlenia dla gatunku.
Obserwuj znaki co kilka dni, szukając oznak kiełkowania. Biały puszysty wzrost (grzybnia) na powierzchni agaru wskazuje na obecność grzyba (ale nie może to być grzyb, który wyrósł z zarodników).

Uprawa grzybów z zarodników

Izolowanie czystej kultury

Porównaj grzybnię z opublikowanymi opisami grzybni, którą próbujesz hodować.
Jeśli grzybnia wygląda jak oczekiwana, oczyść kulturę, wycinając kawałki i przenosząc je na świeże płytki agarowe.
Kontynuuj wycinanie kawałków z końcówki rozszerzających się kolonii, aż czysta kolonia będzie wolna od bakterii.

Przygotowanie potomstwa

Wytnij i przenieś kawałki oczyszczonej grzybni do sterylizowanych słoików z włókna lub substratu zrębków. Rodzaj użytego substratu zależy od gatunku grzyba.
Inkubować główną grzybnię w warunkach odpowiednich dla gatunku, aż substrat zostanie całkowicie skolonizowany grzybnią.
Okresowo wstrząsać pojemnikami grzybni, aby rozdzielić podłoże i przyspieszyć kolonizację.
Użyj głównej grzybni do zaszczepienia innych pojemników i wyprodukowania większej ilości grzybni.

Inokulacja podłoża do wzrostu grzybów

Energicznie potrząśnij pojemnikami grzybni, aby je rozdzielić.
Umieść grzybnię w torebkach lub tacach substratowych do uprawy grzybów.
Ostrożnie wymieszać grzybnię na podłożu, mieszając lub mieszając.
Postępuj zgodnie z opublikowanymi metodami hodowania grzybni i rozpocznij proces owocowania uprawianych gatunków.

Jak

Pracuj szybko podczas nalewania agaru lub przenoszenia inokulum, aby zmniejszyć zanieczyszczenie.
Czas i wysiłek można zaoszczędzić, kupując sterylne i przygotowane wcześniej płytki agarowe.
MEA jest dobrym ogólnym podłożem do uprawy grzybów, ale inny typ podłoża może być bardziej odpowiedni w zależności od gatunku.

Uwaga

Szybkowary mogą się rozgrzać i spowodować obrażenia. Postępuj zgodnie z instrukcjami producenta dotyczącymi konserwacji i obsługi.
Sterylizowane pojemniki są gorące i należy się nimi posługiwać rękawicami odpornymi na ciepło, aby zapobiec poparzeniom i wyciekom.
Pozwól sterylizować pokrywy pojemników, aby ciśnienie wyrównało się podczas procesu ogrzewania i chłodzenia.
Wszystkie pojemniki przeznaczone do sterylizacji muszą być wykonane z materiału nadającego się do sterylizacji w autoklawie.