Zawartość
Szeregowe rozcieńczenia są używane w laboratoriach chemicznych i biologicznych głównie do przeprowadzania eksperymentów. Zwykle są przedstawiane w skali logarytmicznej lub jako wielokrotność 10. W większości przypadków bakterie, komórki i substancje rozpuszczone są rozcieńczane, aby pełnić rolę kontrolerów w eksperymentach. Rozcieńczenia nadal służą do zapewnienia wysokiego stopnia dokładności w eksperymentach dawka-odpowiedź, w których wszystkie próbki pochodzą z tej samej partii. Ponadto może być konieczne zmniejszenie liczby cząstek w próbce do użycia w sprzęcie automatycznym. Kolejne rozcieńczenia kończy się pobierając niewielką objętość oryginalnej próbki, wlewając ją do nowej butelki i przywracając jej pierwotną objętość z rozcieńczonym roztworem. Ogólny wzór jest następujący: stężenie początkowe / współczynnik rozcieńczenia = nowe stężenie. W przykładzie podanym poniżej obliczymy seryjne rozcieńczenie 10 ml od 2,5x10 ^ 7 komórek / ml do 25 komórek / ml przy współczynniku rozcieńczenia 100.
Krok 1
Przed przystąpieniem do pracy z substancjami załóż okulary ochronne i rękawice.
Krok 2
Oznaczyć trzy probówki za pomocą kredki w następujący sposób: 2,5 x 10 ^ 5, 2,5 x 10 ^ 3, 25 komórek / ml.
Krok 3
Użyj wzoru (oryginalne stężenie komórek / współczynnik rozcieńczenia = nowe stężenie), aby rozwiązać pierwsze rozcieńczenie. Pierwotne stężenie będzie wynosić 2,5x10 ^ 7, współczynnik rozcieńczenia 100, a wynik nowego stężenia na tym etapie wyniesie 2,5x10 ^ 5 komórek / ml.
Krok 4
Rozcieńczyć oryginalną próbkę do 2,5x10 ^ 7 komórek / ml 100 razy. Pobrać 1 ml oryginalnego roztworu odpowiednią pipetą i wlać do probówki oznaczonej „2,5 x 10 ^ 5 komórek / ml”. Drugą pipetą wlej dodatkowe 99 ml wody do probówki, aby zakończyć żądane rozcieńczenie.
Krok 5
Ponownie rozcieńczyć komórki o kolejny współczynnik 100. Usunąć w taki sam sposób jak poprzednio, ale teraz z 1 ml probówki 2,5 x 10 ^ 5 komórek / ml wewnątrz probówki oznaczonej „2,5 x 10 ^ 3 komórek / ml. ”. Dodaj ponownie 99 ml wody do nowej probówki, aby dokończyć rozcieńczanie, co da 2,5 x 10 ^ 3 komórek / ml.
Krok 6
Rozcieńczyć teraz komórki po raz ostatni. Powtórz tę samą procedurę, co przed wlaniem do probówki oznaczonej „25 komórek / ml”. Dodaj 99 ml wody, aby zakończyć proces i osiągnij pożądane rozcieńczenie 25 komórek / ml.