Zawartość
UFC to skrót od Colony Forming Units, termin używany w mikrobiologii do ilościowego określenia liczby bakterii obecnych w roztworze. W zależności od stężenia próbki konieczne będzie wykonanie wielu rozcieńczeń i umieszczenie próbek na szalkach Petriego. Jeśli jest wiele kolonii bakterii, zliczanie będzie trudne, a jeśli jest ich niewiele, próbka może nie być reprezentatywna. Na ogół dobrym pomysłem jest umieszczenie próbek oryginalnego roztworu na płytkach, jednego rozcieńczenia 1/10 (1 część roztworu i 9 części soli fizjologicznej), jednego rozcieńczenia 1/100 i jednego rozcieńczenia 1/1000.
Oblicz CFU z rozcieńczeń bakterii
Krok 1
Wykonaj wstępne policzenie każdej płytki po czasie inkubacji bakterii, zwykle dzień lub dwa. Należy liczyć tylko pojedyncze kolonie, które powinny być oddzielnymi, odizolowanymi punktami, a nie zestawy kolonii, które wyrosły razem. Wybierz płytkę, która ma więcej niż 30 i mniej niż 300 kolonii.
Krok 2
Policz liczbę pojedynczych kolonii. To jest numer UFC twojego rozcieńczenia - musisz wykonać proste obliczenia, aby określić UFC na podstawie oryginalnej próbki. W tym przykładzie zostanie użyta hipotetyczna płytka zawierająca 46 kolonii.
Krok 3
Określ rozmiar zastosowanego rozcieńczenia. Najlepiej byłoby oznaczyć szalki Petriego na początku eksperymentu. W tym przykładzie możesz zmieszać 1 ml kultury bakteryjnej z 99 ml roztworu soli. Tworzy to rozcieńczenie 1/100.
Krok 4
Pomnóż stopień rozcieńczenia przez ilość, którą umieścisz na talerzu. Jeśli w tym przykładzie umieścisz 0,1 ml swojego rozcieńczenia 1/100 na agarze, musisz pomnożyć 0,1 x 1/100, aby uzyskać wynik 1/1000 lub 0,001.
Krok 5
Podzielić liczbę UFC rozcieńczenia (liczbę zliczonych kolonii) przez wynik uzyskany w kroku 4. W tym przykładzie należy podzielić 46 przez 1/1000, czyli to samo, co pomnożenie przez 1000. Wynik to 46000 UFC w oryginalna próbka.