Zawartość
- Instrukcje
- Przygotowanie ekstraktu ziemniaczanego
- Przygotowanie mieszanki
- Sterylizacja
- Wylewanie mieszanki
- Jak
- Uwaga
- Czego potrzebujesz
Agar dekstroza ziemniaczana (BDA) jest dobrym półstałym podłożem ogólnego przeznaczenia używanym do tworzenia grzybów. Jest również często używany do izolowania, wzrostu i utrzymywania form grzybowych w formacji. Można kupić gotowe szalki Petriego lub probówki zawierające BDA lub można szybko przygotować BDA przy użyciu komercyjnego premiksu. Jednak nie jest trudno stworzyć prostą i skuteczną wersję przy niskim koszcie.
Instrukcje
-
Umieść ziemniaki na patelni z około 1,2 litra wody z kranu i gotuj przez godzinę na kuchence.
-
Wyjmij patelnię z ognia i schłódź płyn, dopóki nie będzie można go wygodnie obsługiwać (około 10 minut).
-
Wlać płynny ekstrakt ziemniaczany przez filtr lub gazę i zebrać do innego pojemnika.
Przygotowanie ekstraktu ziemniaczanego
-
Dodać dekstrozę i agar do kwart wody ekstrakcyjnej z ziemniaków.
-
Sprawdź pH roztworu za pomocą papieru do testowania pH lub pH-metru.
-
Jeśli pH jest powyżej 6,5, zmniejsz je, dodając za każdym razem jedną kroplę roztworu kwasu chlorowodorowego i wykonaj kolejny test.
-
Jeśli pH jest mniejsze niż 6, wyreguluj je, dodając jedną kroplę roztworu wodorotlenku sodu i wykonując nowy test.
Przygotowanie mieszanki
-
Dobrze wymieszać i podzielić na mniejsze partie po 250 mililitrów. Wlać do czterech fiolek o pojemności 500 ml (każda fiolka powinna być w połowie pełna, aby nie zagotować).
-
Naładuj każdą fiolkę kawałkiem swobodnie złożonej folii aluminiowej, aby folia nie spadła, ale nie wykonuj pełnego uszczelnienia.
-
Umieść słoiki w szybkowarze.
-
Uruchom szybkowar zgodnie z instrukcjami producenta dotyczącymi sterylizacji BDA w temperaturze 121 ° C przy 15 psi przez 15 minut.
-
Wyłączyć szybkowar i pozwolić mu powrócić do ciśnienia atmosferycznego, a następnie wyjąć fiolki i pozostawić do ostygnięcia, aż będą mogły być obsługiwane.
Sterylizacja
-
Ustaw płytki Petriego na płaskiej powierzchni.
-
Po schłodzeniu fiolek do temperatury manipulacji, ale zanim medium zacznie zestalać się, przytrzymaj fiolkę jedną ręką i usuń osłonę foliową drugą ręką.
-
Dla każdej szalki Petriego zdejmij pokrywę jedną ręką, szybko napełnij połowę płynnym BDA i załóż pokrywkę.
-
Powtarzaj krok 3 powyżej, aż wszystkie płytki Petriego zostaną wypełnione.
-
Jeśli pozostało jakieś BDA, odbierz butelkę z oryginalną folią, pozostaw do ostygnięcia i zestalenia, dokręć aluminiową pokrywkę i przechowuj w lodówce.
Wylewanie mieszanki
Jak
- Większość grzybów rośnie dobrze w warunkach lekko kwaśnych, tak że końcowa wartość pH powinna wynosić od 6 do 6,5, chociaż można ją dostosować do dowolnego pH wymaganego dla określonego gatunku.
- Pozwól, aby osłony szalki Petriego otworzyły się na tyle, aby umożliwić nalanie mieszanki i jak najszybsze pokrycie.
- Potrzeba praktyki, aby uzyskać szybkość i wydajność rozlania agaru na płytkach Petriego.
- Po schłodzeniu i zestaleniu naczynia BDA można owinąć w plastik i przechowywać przez wiele miesięcy w lodówce.
- Większość wody z kranu zawiera minerały korzystne dla wzrostu grzybów, jednak jeśli miejscowa woda ma ekstremalne stężenia mineralne lub bardzo wysokie lub niskie pH, zastąp ją wodą destylowaną.
Uwaga
- Należy przestrzegać wszystkich instrukcji obsługi i bezpieczeństwa szybkowaru, który ma być używany.
- Zostaw kapsle butelek luźne podczas sterylizacji szybkowaru, aby uniknąć nadciśnienia.
- Podczas pracy z gorącymi pojemnikami należy nosić rękawice odporne na ciepło.
- Podczas korzystania z szybkowaru zakładaj okulary ochronne podczas wyjmowania sterylnego BDA i podczas nalewania.
Czego potrzebujesz
- 300 g obranych i pokrojonych ziemniaków
- Pan
- Sitko kuchenne
- Tester PH lub pH-metr
- 1 mol kwasu solnego
- 1 molowy wodorotlenek sodu
- 4 fiolki szklane Ehrlenmayera o pojemności 500 ml (lub inne autoklawowalne pojemniki z wąskimi ustami)
- 10 g proszku dekstrozy (glukozy)
- 20 g agaru
- Folia aluminiowa
- Szybkowar
- Sterylne szalki Petriego